เพื่อป้องกันการปนเปื้อนข้ามระหว่างการทำงานข้อกำหนดหลักสำหรับการออกแบบการก่อสร้างและการจัดการการดำเนินงานคือ:
1. การออกแบบและก่อสร้างห้องปฏิบัติการ, ระบบการทำงานที่ปลอดภัยหรือขั้นตอนการปฏิบัติงานมาตรฐานความปลอดภัยจะต้องเป็นไปตามข้อกำหนดของ" ข้อกำหนดทั่วไปสำหรับความปลอดภัยทางชีวภาพของห้องปฏิบัติการ GG; GB19489
2. PCR แบ่งออกเป็นสี่ส่วนการทำงานตามขั้นตอนการทำงาน ได้แก่ พื้นที่เก็บสารและพื้นที่เตรียมสารพื้นที่เตรียมชิ้นงานพื้นที่ขยายและพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์ขยาย หากติดตั้งเครื่องมือ PCR แบบเรืองแสงแบบเรียลไทม์พื้นที่การขยายและการวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์สามารถรวมกันได้ แต่ละพื้นที่หน้าที่จะต้องทำเครื่องหมายไว้อย่างชัดเจนและอุปกรณ์และสิ่งของต่าง ๆ ในพื้นที่การทำงานที่แตกต่างกันจะต้องไม่ถูกผสมกัน
ทิศทางการไหลของอากาศของห้องปฏิบัติการ PCR สามารถดำเนินการได้ตามพื้นที่จัดเก็บรีเอเจนต์และพื้นที่เตรียมการ→พื้นที่เตรียมชิ้นงานตัวอย่าง→พื้นที่ขยาย→พื้นที่ขยายผลิตภัณฑ์วิเคราะห์เพื่อป้องกันไม่ให้ผลิตภัณฑ์ขยายขยายเข้าสู่พื้นที่ขยายก่อนพร้อมกับการไหลของอากาศ มันสามารถดำเนินการในลักษณะของการลดความดันอากาศจากการจัดเก็บรีเอเจนต์และพื้นที่เตรียมการ→พื้นที่เตรียมชิ้นงานตัวอย่าง→พื้นที่การขยาย→พื้นที่การวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์การขยาย สามารถทำได้โดยการติดตั้งพัดลมดูดอากาศอุปกรณ์ระบายแรงดันลบหรือวิธีการอื่น ๆ ที่เป็นไปได้
3. การเข้าสู่พื้นที่ทำงานแต่ละแห่งควรปฏิบัติตามทิศทางเดียวอย่างเคร่งครัดนั่นคือการจัดเก็บรีเอเจนต์และพื้นที่เตรียมการ→พื้นที่เตรียมชิ้นงาน→พื้นที่ขยายตัวอย่าง→พื้นที่ขยายการวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์ ควรใช้พื้นที่ทำงานที่แตกต่างกัน (เช่นสีต่างกัน) คนงานจะไม่นำเสื้อผ้าออกมาเมื่อออกจากพื้นที่ทำงาน
4. การทำความสะอาดห้องปฏิบัติการควรดำเนินการในทิศทางของการจัดเก็บรีเอเจนต์และพื้นที่เตรียมการ→พื้นที่เตรียมชิ้นงานตัวอย่าง→พื้นที่ขยายตัวอย่าง→พื้นที่ขยายผลิตภัณฑ์วิเคราะห์ พื้นที่ทดลองต่าง ๆ ควรมีอุปกรณ์ทำความสะอาดของตัวเองเพื่อป้องกันการปนเปื้อนข้าม
5. หลังจากงานสิ้นสุดลงต้องทำความสะอาดพื้นที่ทำงานทันที พื้นผิวของม้านั่งในห้องปฏิบัติการในพื้นที่ทำงานควรสามารถทนต่อการฆ่าเชื้อโรคและผลการทำความสะอาดของสารเคมีเช่นโซเดียมไฮโปคลอไรต์ การฉายรังสีอัลตราไวโอเลตบนพื้นผิวของบัลลังก์ห้องปฏิบัติการควรสะดวกและมีประสิทธิภาพ เนื่องจากระยะทางและพลังงานของการฉายรังสีอัลตราไวโอเลตมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อผลกระทบจากการปนเปื้อนจึงสามารถใช้หลอดรังสีอุลตร้าไวโอเล็ตแบบเคลื่อนที่ได้ (ความยาวคลื่น 254nm) และหลังจากการทำงานเสร็จสิ้นแล้ว . เนื่องจากผลิตภัณฑ์ที่ถูกขยายมีเพียงไม่กี่ร้อยหรือสิบคู่ฐาน (bp) จึงไม่ไวต่อความเสียหายของรังสี UV ดังนั้นชิ้นส่วนที่ขยายด้วยรังสีที่ฉายรังสี UV จะต้องได้รับการฉายรังสีเป็นเวลานานโดยเฉพาะอย่างยิ่งในชั่วข้ามคืน
ฟังก์ชั่นของการจัดเก็บสารและพื้นที่เตรียมสารคือการเตรียมสารเคมีการจัดเก็บการจ่ายสารเคมีและการเตรียมส่วนผสมของปฏิกิริยาการขยายรวมถึงการจัดเก็บและการจัดเตรียมวัสดุสิ้นเปลืองเช่นหลอด centrifuge และเคล็ดลับ วัสดุเช่นรีเอเจนต์สำหรับจัดเก็บและวัสดุสิ้นเปลืองที่ใช้สำหรับการเตรียมตัวอย่างควรเคลื่อนย้ายไปยังพื้นที่จัดเก็บและรีเอเจนต์โดยตรงและไม่สามารถผ่านพื้นที่ตรวจจับการขยาย วัสดุควบคุมเชิงบวกและวัสดุควบคุมคุณภาพในชุดไม่ควรเก็บไว้ในบริเวณนี้ แต่ควรเก็บไว้ในบริเวณนี้ พื้นที่การประมวลผลของชิ้นงาน
หน้าที่ของพื้นที่เตรียมชิ้นงานคือ: การสกัดกรดนิวคลีอิก (RNA, DNA) การจัดเก็บและการเพิ่มลงในหลอดปฏิกิริยาการขยาย สำหรับการดำเนินงานที่เกี่ยวข้องกับตัวอย่างทางคลินิกควรมีการปฏิบัติตามข้อกำหนดของอุปกรณ์ป้องกันการป้องกันส่วนบุคคลและข้อกำหนดการใช้งานสำหรับห้องปฏิบัติการรองด้านความปลอดภัยทางชีวภาพ เนื่องจากการปนเปื้อนของละอองลอยอาจเกิดขึ้นในระหว่างการผสมตัวอย่างและการทำให้บริสุทธิ์ด้วยกรดนิวคลีอิกจึงสามารถกำหนดสภาวะความดันเป็นบวกในบริเวณนี้เพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนของละอองในพื้นที่ใกล้เคียง เพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนข้ามระหว่างตัวอย่างหลังจากเพิ่มกรดนิวคลีอิกที่จะทดสอบหลอดปฏิกิริยาที่มีส่วนผสมของปฏิกิริยาจะต้องครอบคลุม สำหรับวัสดุที่อาจติดเชื้อต้องเปิดฝาในตู้นิรภัยชีวภาพและต้องมีขั้นตอนที่ชัดเจนสำหรับการจัดการตัวอย่างและการปิดใช้งาน
หน้าที่ของโซนการขยายคือ: การสังเคราะห์ DNA, การขยายและการตรวจจับดีเอ็นเอ เพื่อหลีกเลี่ยงมลภาวะที่เกิดจากละอองลอยควรลดการเดินในพื้นที่ จะต้องมีการตั้งข้อสังเกตว่าจะต้องไม่เปิดหลอดปฏิกิริยาที่ทดสอบทั้งหมดในบริเวณนี้
หน้าที่ของพื้นที่การวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์ที่ถูกขยายคือ: การวิเคราะห์เพิ่มเติมและการกำหนดชิ้นส่วนที่ขยายเช่นการไฮบริไดเซชันอิเล็กโทรไลต์การย่อยของเอนไซม์การแปลงสภาพของการวิเคราะห์ของเหลวที่มีประสิทธิภาพสูง บนเยื่อหุ้มหรือบนไมโครเพลตหรือชิป (การติดฉลาก radionuclide หรือการติดฉลากที่ไม่ใช่กัมมันตภาพรังสี), agarose gel electrophoresis โดยตรงหรือย่อย, electrophoresis เจลโพลีอะคริลาไมด์, การถ่ายโอนใต้, วิธีการลำดับกรดนิวคลีอิก
พื้นที่การวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์เครื่องขยายเสียงเป็นแหล่งที่มาหลักของการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์เครื่องขยายเสียงในห้องปฏิบัติการ PCR ดังนั้นควรใช้ความระมัดระวังเพื่อหลีกเลี่ยงการนำผลิตภัณฑ์เครื่องขยายเสียงออกจากบทความและเสื้อผ้าทำงานในพื้นที่นี้ เมื่อใช้วิธี PCR-ELISA ในการตรวจจับผลิตภัณฑ์ที่มีการขยายจะต้องใช้เครื่องล้างจานเพื่อล้างจานและต้องรวบรวมของเหลวเสียใน 1 mol / L HCl และไม่สามารถเทลงในห้องปฏิบัติการได้ แต่ควรทิ้งไป จากห้องปฏิบัติการ PCR Drop เคล็ดลับที่ใช้จะต้องแช่ใน 1 mol / L HCl แล้ววางในถุงขยะสำหรับการกำจัดตามขั้นตอนเช่นการเผา เนื่องจากบริเวณนี้อาจใช้การผ่าเหล่าทางพันธุกรรมและสารพิษบางชนิดเช่นเอทิเดียมโบรไมด์อะคริลาไมด์ฟอร์มัลดีไฮด์หรือกัมมันตภาพรังสี ฯลฯ ควรคำนึงถึงการป้องกันความปลอดภัยของผู้ทดลอง